实验室常用贮存液的配制（1）

1 ． 30% 丙烯酰胺溶液

【配制方法】将 29g 丙烯酰胺和 1g N ， N ’ - 亚甲双丙烯酰胺溶于总体积为 60ml 的水中。加热至 37 ℃ 溶解之，

补加水至终体积为 100ml 。用 Nalgene 滤器（ 0.45 μ m 孔径）过滤除菌，查证该溶液的 pH 值应不大于 7.0 ，置棕色 瓶

中保存于室温。

【注意】丙烯酰胺具有很强的神经毒性并可以通过皮肤吸收，其作用具累积性。称量丙烯酰胺和亚甲双丙烯酰

胺时应戴手套和面具。可认为聚丙烯酰胺无毒，但也应谨慎操作，因为它还可能会含有少量未聚合材料。一些价格

较低的丙烯酰胺和双丙烯酰胺通常含有一些金属离子，在丙烯酰胺贮存液中加入大约 0.2 体积的单床混合树脂（ M B-

1Mallinckrodt ），搅拌过夜，然后用 Whatman 1 号滤纸过滤以纯化之。在贮存期间，丙烯酰胺和双丙烯酰胺会缓慢

转化成丙烯酰和双丙烯酸。

2 ． 40% 丙烯酰胺

【配制方法】把 380g 丙烯酰胺（ DNA 测序级）和 20g N ， N ’ - 亚甲双丙烯酰胺溶于总体积为 600ml 的蒸馏水 中 。

继续按上述配制 30% 丙烯酰胺溶液的方法处理，但加热溶解后应以蒸馏水补足至终体积为 1L 。

【注意】见上述配制 30% 丙烯酰胺的说明， 40% 丙烯酰胺溶液用于 DNA 序列测定。

3 ．放线菌素 D 溶液

【配制方法】把 20mg 放线菌素 D 溶解于 4ml 100% 乙醇中， 1 ： 10 稀释贮存液，用 100% 乙醇作空白对照读取

OD440 值。放线菌素 D （分子量为 1255 ）纯品在水溶液中的摩尔消化系数为 21 ， 900 ，故而 1mg/ml 的放线菌素 D

溶液在 440nm 处的吸光值为 0.182 ，放线菌素 D 的贮存液应放在包有箔片的试管中，保存于 -20 ℃ 。

【注意】放线菌素 D 是致畸剂和致癌剂，配制该溶液时必须戴手套并在通风橱内操作，而不能在开放在实验 桌

面上进行，谨防吸入药粉或让其接触到眼睛或皮肤。

药厂提供的作治疗用途的放线菌素 D 制品常含有糖或盐等添加剂。只要通过测量贮存液在 440nm 波长处的光

吸收确定放线菌素 D 的浓度，这类制品便可用于抑制自身引导作用。

4 ． 0.1mol/L 腺苷三磷酸（ ATP ）溶液

【配制方法】在 0.8ml 水中溶解 60mg ATP, 用 0.1mol/L NaOH 调至 pH 值至 7.0 ，用蒸馏水定容 1ml ，分装成小

份保存于 -70 ℃

5 ． 10mol/L 乙酸酰溶液

【配制方法】把 770g 乙酸酰溶解于 800ml 水中，加水定容至 1L 后过滤除菌。

6 ． 10% 过硫酸铵溶液

【配制方法】把 1g 过硫酸铵溶解于终量为 10ml 的水溶液中，该溶液可在 4 ℃ 保存数周。

7 ． BCIP 溶液

【配制方法】把 0.5g 的 5- 溴 -4- 氯 -3- 吲哚磷酸二钠盐（ BCIP ）溶解于 10ml 100% 的二甲基甲酰胺中，保存于 4 ℃

8 ． 2 × BES 缓冲盐溶液

【配制方法】用总体积 90ml 的蒸馏水溶解 1.07g 盐溶液 BES[N ， N- 双（ 2- 羟乙基） -2- 氨基乙磺酸 ] 、 1.6g NaC l

和 0.027g Na2HPO4 ，室温下用 HCl 调节 该溶液的 pH 值至 6.96 、然后加入蒸馏水定容至 100ml ，用 0.22 μ m 滤器

过滤除菌，分装成小份，保存于 -20 ℃ 。

9 ． 1mol/L CaCl2 溶液

【配制方法】在 200ml 蒸馏水中溶解 54g CaCl2?6H2O ，用 0.22 μ m 滤器过滤除菌，分装成 10ml 小份贮存于 -2 0 ℃ 。

【注意】制备感受态细胞时，取出一小份解冻并用蒸馏水稀释至 100ml ，用 Nalgene 滤器（ 0.45 μ m 孔径）过 滤

除菌，然后骤冷至 0 ℃ 。