各种HRP酶标记成抗体的效价测定程序如下:如羊抗鼠IgG-HRP的效价测定抗原包板:15μg/ml小鼠IgG-pH9.6·CB液 ↓37℃包被60min或4℃过夜 ↓PBST洗板3次,5min/次 ↓加入倍比稀释的HRP标记抗体 ↓37℃ 30mi...
1、当抗体浓度在5mg/ml以上,可用免疫双相扩散法测定抗体效价。 2、当抗体浓度低于3mg/ml时,或者对应抗原为小分子(如生物素,地高辛等)时必须用ELISA法测定抗体活性,同上步骤。 操作步骤如下:1、1%离子琼脂配制及倒板: 称1g琼脂糖或日本琼脂粉,加入100ml 0.05U pH8.6巴比妥-HCL缓冲液中,水浴下加热至完全融化,取3ml倒在普通载玻片上(...
蛋白溶液的浓缩技术,目前常用的有化学吸水剂浓缩,透析袋表面蒸发浓缩、超过滤浓缩及冷冻干燥等方法。 1、化学吸水剂浓缩: 将浓缩前的蛋白液装入透析袋中,把透析袋外边覆盖上干的吸水剂,像聚乙二醇(PEG)或者聚乙烯吡咯烷酮(Polyvlny1Prrolidine Pvp)等,也可以将装有样品的透析袋浸于20%~30%PEG溶液中,浓缩至所需体积,即可将样品取出。 当要浓...