蛋白溶液的浓缩

    蛋白溶液的浓缩技术，目前常用的有化学吸水剂浓缩，透析袋表面蒸发浓缩、超过滤浓缩及冷冻干燥等方法。

    1、化学吸水剂浓缩：

    将浓缩前的蛋白液装入透析袋中，把透析袋外边覆盖上干的吸水剂，像聚乙二醇（PEG）或者聚乙烯吡咯烷酮（Polyvlny1Prrolidine Pvp）等，也可以将装有样品的透析袋浸于20%~30%PEG溶液中，浓缩至所需体积，即可将样品取出。

    当要浓缩小体积的样品时，也可以用交联度高的凝胶颗粒（如SePhadex G-25）或干燥的聚丙烯酰胺凝胶条（T）10%以上）直接放到待浓缩的样品液中，当凝胶膨胀后即吸收部分水分以达到浓缩目的。

    2、蒸发法：

    将待浓缩的溶液置于透析袋中，然后将透析袋挂在冰箱中，或用电扇吹风。水分通过半透膜扩散并蒸发。此法随简便易行，但效率低。且浓缩后样品盐分高，适宜小体积，时间不紧迫的情况下采用此方法。

    3、超过率法：

    超过滤法浓缩各种大分子溶液，具有速度快、不影响生物活性、不消耗任何试剂，同事还可以用脱盐及去除小分子杂质相结合等优点，它是当前免疫化学与生物化学中浓缩**方法，操作步骤同脱盐的几点。

    4、冷冻干燥法：

    生物样品的冷冻干燥方法，即是制备**或长期保存样品的手段，也是高分子溶液的浓缩的较好方法，在具备冷冻设备的条件下都可以进行。

    主要技术要点：

    （1）样品的处理，如果干燥前样品浓度低于1mg/ml，或者冻干过程会被破坏其生物活性，需要预先加入一定浓度的蛋白保护剂。

    （2）预冷样品，常用乙醇干冰或低温冰箱预冻，将蛋白液薄薄的预冻在干燥的容器壁上。

    （3）低温干燥因干燥机种类较多，操作不一，不再赘述。