酶标抗体效价测定程序

各种HRP酶标记成抗体的效价测定程序如下：

如羊抗鼠IgG-HRP的效价测定

抗原包板：15μg/ml小鼠IgG-pH9.6·CB液

              ↓

37℃包被60min或4℃过夜

                     ↓

PBST洗板3次，5min/次

                     ↓

加入倍比稀释的HRP标记抗体

                     ↓

37℃ 30min

                     ↓

PBST洗板5min/次×3

                     ↓

底物液0.1ml/孔 37℃ 5～10min

                     ↓

终止液：2N H₂SO₄   0.05ml/孔

                     ↓

OD450nm测定OD值

阳性OD450nm值，比对照值大3倍孔，为判断效价稀释度。